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中药学论文_大黄牡丹汤对脂多糖诱导肠上皮细胞
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物:
1.1.2 主要试剂:
1.1.3 仪器:
1.2 方法
1.2.1 将32只大鼠随机分为4组:
1.2.2 细胞分组及培养:
1.2.3 MTT法检测肠上皮细胞活性:
1.2.4 流式细胞术检测肠上皮细胞凋亡情况:
1.2.5 蛋白质免疫印迹技术(Western-blot,WB)检测NLRP3、caspase-1和GSDMD-C的表达水平:
1.2.6 免疫荧光法检测细胞中NLRP3的表达:
1.2.7 ELISA检测细胞上清中IL-1β和IL-18的含量:
1.3 统计学方法:
2 结果
2.1 大黄牡丹汤对LPS损伤肠上皮细胞活性、及凋亡率的影响:
2.2 大黄牡丹汤对LPS损伤肠上皮细胞NLRP3、caspase-1和GSDMD-C蛋白表达水平的影响:
2.3 大黄牡丹汤对LPS损伤肠上皮细胞IL-1β和IL-18含量的影响:
3 讨论
文章摘要:目的:探究大黄牡丹汤对脂多糖(LPS)诱导的肠上皮细胞焦亡的作用,以及对Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(NLRP3/caspase-1)通路的影响。方法:将肠上皮细胞随机分为对照组、LPS组和大黄牡丹汤低、中、高剂量组(2.52、5.04、7.56g/kg),对照组加入空白血清,LPS组加入LPS和空白血清,大黄牡丹汤组加入LPS和含药血清。噻唑蓝(MTT)法检测肠上皮细胞活性,流式细胞术检测肠上皮细胞凋亡情况,蛋白质免疫印迹技术(WB)检测NLRP3、caspase-1和消皮素D碳端(GSDMD-C)的表达水平,免疫荧光法检测细胞中NLRP3的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测促炎因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18的含量。结果:与对照组相比,LPS组细胞活性明显降低,细胞凋亡指数明显升高,NLRP3、caspase-1、GSDMD-C蛋白表达及IL-1β、IL-18含量显著升高(均P<0.05);与LPS组比较,大黄牡丹汤各组细胞活性明显升高,细胞凋亡指数明显降低,NLRP3、caspase-1、GSDMD-C蛋白表达及IL-1β、IL-18含量显著降低(均P <0.05)。结论:大黄牡丹汤可抑制NLRP3/caspase-1通路,降低LPS诱导的肠上皮细胞焦亡。
文章关键词:
论文分类号:R285
文章来源:《牡丹》 网址: http://www.mdzzs.cn/qikandaodu/2021/1202/2276.html